MiniOne 전기영동 장치 사용법

Setting Up Your MiniOne Electrophoresis System

 

 

이 영상에서는 Mini One 전기영동 시스템 사용 방법에 대해 안내합니다.  

 

 

미니원 키트 구성품

미니원 키트에는 캐리지, 버퍼 탱크, 젤 캐스팅 시스템, 포토 후드, 전원 코드, 두개의 젤 플레이트와 샘플을 로딩하기 위한 P20 마이크로파이펫이 포함되어 있습니다. 캐스팅 시스템에는 플라스틱 커버, 캐스팅 스탠드, 두개의 투명한 아크릴 젤 트레이, 그리고 두개의 양면 콤(comb)이 있습니다. 

 

 

캐리지 이용 시 주의사항

 

검은색 캐리지 안에 어떠한 액체도 들어가지 않도록 주의해야 합니다. 캐리지 안에 있는 금색 리벳은 버퍼 탱크에 있는 전극과 접촉하는 부분입니다. 전원 코드를 캐리지에 연결하여 사용하면 되고, 이때 장치를 기울여서 들지 않도록 해야합니다. 샘플 로딩을 시작한 후 구성품들이 움직이지 않도록 로딩 전에 캐리지 안에 있는 각 부품이 정확히 위치해있는지 다시 한번 확인해야 합니다. 

 

 

버퍼 탱크 이용방법 및 주의사항

 

버퍼 탱크 아랫면에는 (+), (-) 표시가 되어있습니다. 버퍼 탱크 옆면을 보면, 한쪽 면은 매끄럽고 다른 한쪽 면은 전극 부분인 범프가 살짝 나와있습니다. 또한 탱크 옆면에 버퍼를 채우는 선이 그려져 있습니다. 버퍼 탱크 안쪽에는 플레이트를 올려놓을 수 있는 젤 트레이 플랫폼이 있습니다. 플레이트에는 작은 노브가 있어서 플레이트는 버퍼 탱크에서 한방향으로만 올려놓을 수 있습니다. 

 

아가로스 젤을 올려놓은 젤 트레이를 플레이트 위에 올려놓습니다. 이때, 젤 트레이 역시 한방향으로만 올려놓을 수 있기 때문에 젤 트레이 옆면이 버퍼 탱크에 알맞게 들어가도록 위치시켜야 합니다. 젤 트레이가 탱크 안에 잘 들어가지지 않는다면 힘으로 젤 트레이를 넣으려고 하지 말고 젤 트레이의 방향을 다시 한번 확인해야 합니다. 그 후 젤 트레이 플랫폼에 편평하게 위치해있는지, 젤에 있는 well 부분이 버퍼 탱크의 음극 쪽에 가깝게 위치했는지 확인합니다. 버퍼 탱크를 캐리지 안에 넣은 후 버퍼 탱크의 상단 모서리 부분 수평이 맞춰졌는지 확인하고, 전극이 캐리지 안에 있는 금색 리벳과 접촉되어 있는지 확인합니다. 구성품들이 잘 위치해있는지 확인이 되면 1x running buffer 135mL를 버퍼 탱크의 한쪽면에 부어줍니다. 젤 트레이 아래 있는 공기 방울이 다른 쪽 면으로 다 이동한 것을 확인하면, 버퍼 탱크의 다른쪽 면에도 버퍼를 부어도 됩니다. 이때, 버퍼가 젤을 완전히 덮으면서 버퍼 채우는 선은 넘지 않도록 주의해야 합니다. 

 

 

샘플 로딩 및 포토후드 이용방법

 

샘플을 로딩할 때는 저강도 빛을 켜놓으면 well을 더 선명하게 볼 수 있습니다. DNA 샘플의 경우 검은색 플레이트를 이용하고, colored dye 샘플의 경우 회색 플레이트를 이용합니다. 각 샘플에 대해 well 당 10 ㎕씩 로딩해줍니다. 서로 다른 샘플을 로딩할 때는 파이펫 팁을 교체해줍니다. 샘플을 다 로딩한 후에는 젤을 움직이지 않도록 주의해야 합니다.

 

샘플 로딩이 끝나면 캐리지에 후드를 올려놓고 파워 버튼을 눌러줍니다. LED에 초록색 불이 들어오면 전원이 잘 연결되었다는 것을 의미하며 실험을 진행하면 됩니다. 캐리지에서 후드를 떼어내면 전원이 자동으로 꺼집니다. 후드를 다시 캐리지에 올려놓을 경우 LED에 초록색 불이 들어오는지 확인하고 만약 불이 들어오지 않으면 파워 버튼을 2분 안에 다시 눌러줍니다.

 

 

젤 전개 및 결과물 사진 촬영

 

전극의 음극 쪽에 버블이 생기는 것을 발견한다면 버퍼와 젤에 전류가 흐르고 있음을 알 수 있습니다. DNA 샘플이 분리되는 과정을 보면 loading dye가 전극의 양극 쪽으로 이동하는 것을 볼 수 있습니다. 젤 전개는 25분 정도 진행하며,

dye가 젤 밖으로 나가기 전에 파워를 끕니다. 이를 위해 보통 젤을 5분마다 확인합니다. 

핸드폰 카메라 부분을 포토후드 위에 올려놓고 사진을 찍을 수 있습니다. 포토후드는 이미 대부분의 스마트 기기와의 최적의 초점거리에 있기 때문에 줌 기능을 사용하지 않는 것이 좋습니다. DNA 샘플을 이용한 경우, 하이라이트 세팅을 이용하고 형광 눈금자가 사진에 잘 보이는지 확인합니다. 사진을 다 찍은 후에는 블루라이트를 꺼줍니다. GelGreen이나

dye 키트를 사용한 경우, 아가로스 젤은 일반 쓰레기에 버리면 됩니다. 

 

MiniOne 전기영동 장치 보러가기 

문의 : 고마바이오텍(주) (02-579-8787 / koma@komabiotech.co.kr)