MiniOne 젤 컵 및 캐스팅 시스템 사용법

How to Use MiniOne Gel Cups and Casting System

 

 

이 영상에서는 MiniOne 젤 컵과 캐스팅 시스템을 이용하여 아가로스 젤을 만드는 방법에 대해 안내합니다.

 

준비물 : Gel green cup, 전자레인지, 캐스팅 스탠드, 캐스팅 트레이, 콤(comb), 페이퍼 타올

 

 

젤 컵 이용방법 

 

아가로스 젤 덩어리가 든 컵을 책상에 톡톡 두드려서 바닥에 붙어있는 젤 덩어리를 떼어냅니다. 젤 컵의 윗부분 비닐을 살짝 뜯고 전자레인지 안에 넣습니다. 밀폐된 컵은 전자레인지에서 폭발할 수 있으므로 젤 컵을 밀폐된 상태로 넣지 않는 것이 중요합니다. 하나의 젤 컵으로는 하나의 젤을 만들 수 있습니다. 일반적으로 전자레인지에 돌리는 시간은 20초부터 시작합니다. 5개의 젤 컵까지 한번에 녹일 수 있으며, 이때 전자레인지에 돌리는 시간은 30초 이상으로 더 길어집니다. 

 

아가로스 젤을 녹이는 동안 캐스팅 스탠드를 준비합니다. 젤 캐스팅 스탠드 하나로 동시에 두개의 젤을 만들 수 있습니다. 뚜껑을 열고 스탠드 안에 아크릴 젤 캐스팅 트레이를 올려 놓습니다. 트레이는 한 방향으로만 부드럽게 들어가기 때문에 힘을 줘서 억지로 넣지 않고 방향을 잘 맞춰 넣어야 합니다.

 

젤 컵을 전자레인지에서 꺼내고, 녹지 않은 아가로스 젤이 있는지 확인하며 젤 컵을 흔들어 줍니다. 투명해서 덩어리가 잘 보이지 않을 수 있기 때문에 꼼꼼하게 확인해야 합니다. 작은 덩어리가 남아있다면 젤 컵을 다시 전자레인지에 넣고 5초 간 돌려줍니다. 그 후 젤 컵을 흔들며 녹지 않은 젤 덩어리가 있는지 다시 확인합니다. 아가로스 젤이 완전히 녹았는지 확인하는 한가지 방법은 거품이나 그림자가 없는지 확인하는 것입니다. 완전히 다 녹은 아가로스 젤은 다 녹지 않은 아가로스 젤보다 빛을 더 부드럽게 굴절시킵니다. 다 녹은 것이 확인되면 15초 동안 식혀줍니다. 

 

 

젤 캐스팅 방법

 

녹인 젤 컵을 하나의 젤 캐스팅 트레이에 붓습니다. 아가로스가 젤 트레이 아래로 스며들 수 있지만 젤은 이와 상관없이 전개되기 때문에 걱정하지 않으셔도 됩니다. 캐스팅 스탠드에 콤을 넣습니다. 젤은 6개의 큰 well 또는 9개의 작은 well 중 선택하여 만들 수 있습니다. DNA 샘플을 전개할 경우 콤을 캐스팅 스탠드의 가장 끝쪽 슬롯에 놓아야 합니다. 젤 캐스팅 스탠드 중앙에도 콤을 넣을 수 있는 슬롯이 있습니다. 하지만 여기는 dye 키트를 사용한 전기영동 진행 시에만 이용되며 DNA 샘플에는 이용하면 안됩니다. 콤의 양쪽 끝부분을 보면 한쪽 면이 다른 쪽 면보다 넓습니다. 콤은 캐스팅 스탠드에 한 방향으로만 들어갈 수 있기 때문에 캐스팅 스탠드와 콤이 잘 맞도록 방향을 맞춰 넣어야 합니다. 방향이 정해져 있기 때문에 힘을 줘서 억지로 넣으려고 하면 안되며 콤이 곧고 편평하게 놓였는지 확인해야 합니다.

 

아가로스 젤이 충분히 굳도록 최소 10분간 건드리지 않고 그대로 둡니다. 시간이 지나면 젤이 완전히 굳었는지 다시 한번 확인합니다. 투명했던 아가로스 젤이 처음보다 불투명하고 흐려 보이는 것을 확인할 수 있습니다. 젤이 굳은 것을 확인하면 캐스팅 스탠드를 잡고 콤을 살짝 흔들면서 천천히 위로 빼냅니다. 스탠드에서 캐스팅 트레이를 꺼낼 때는 트레이의 측면을 잡고 위로 끌어올려야 합니다. 젤 캐스팅 트레이의 바닥에 묻어있는 아가로스 젤은 페이퍼 타올로 닦고, 트레이의 측면은 닦지 않도록 주의해야 합니다.

 

 

젤 보관 방법

 

젤을 하룻밤 보관해야 한다면 젤과 캐스팅 트레이를 캐스팅 스탠드 안에 둔 채로 보관합니다. 젤을 전개할 때 사용하는 버퍼로 well을 채운 후, 표면에 1mL의 버퍼를 넣습니다. 버퍼가 전체 표면에 잘 퍼져 있는지 확인하기 위해 캐스팅 시스템을 살짝 흔들어 줍니다. 그 후 덮개를 캐스팅 스탠드 위에 놓고 4℃에서 보관합니다. Gel green cup은 빛에 민감한 DNA stain을 포함하고 있으므로 가능한 빛을 쬐지 않도록 해야 합니다. 이를 위해 캐스팅 스탠드를 알루미늄 호일로 감싸는 것은 하나의 좋은 방법이 될 수 있습니다. 이제 새로 만든 젤을 미니원 전기영동 시스템에 사용할 준비가 다 되었습니다. 

 

 

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